太原β-烟酰胺单核苷酸生产企业

时间:2020年11月22日 来源:

β-烟酰胺单核苷酸苷转移酶的表达、纯化及活性测定,目的获得具有较高纯度和酶活性的烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶-1(Nmnat1),为进一步对其功能及调控的研究奠定基础。方法在大肠杆菌中进行Nmnat1表达的条件优化,采用Ni-NTA亲和层析法对目的蛋白进行纯化,并通过酶联荧光法测定酶活性。结果 BL21-CondonPlus (DE3)-RIL为适宜的宿主菌,优化的蛋白表达条件为:在2×YT培养基(37μg/ml氯霉素和75μg/ml卡那霉素)中于28℃、0.5mmol/LIPTG(isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导8h。纯化获得的Nmnat1蛋白具有较高的纯度和酶活性。结论适宜的宿主菌对Nmnat1蛋白的高效表达至关重要,进行表达条件优化后可获得大量具有较高纯度和酶活性的目的蛋白。β-烟酰胺单核苷酸应与氧化剂、食用化学品分开存放,切忌混储。保持容器密封。太原β-烟酰胺单核苷酸生产企业

β-烟酰胺单核苷酸纯化过程:将浓缩后的粗品溶液用磷酸溶液或盐酸溶液调pH至3-7 ,将色谱柱用30%以上的乙醇冲洗干净后平衡上样,上样量为350-400g。线性梯度洗脱40min ,收集目的峰。浓缩及冻干:将纯化后的样品溶液用膜浓缩设备(截留分子量200的中空纤维膜)纳滤浓缩至100-150g/L ,然后用真空冷冻干燥机冻干,得到纯度大于98%的β -烟酰胺单核苷酸,总收率可以达到80.9%。通过收集样品的目的峰,当其达到标准时,则将其用膜浓缩设备进行纳滤,再用真空冷冻干燥机冻干,获得纯化的烟酰胺单核苷酸。由本发明所述方法制备的冻干产品烟酰胺单核苷酸,其纯度可达98% 。太原β-烟酰胺单核苷酸生产企业NMN/β-烟酰胺单核苷酸有什么作用?

β-烟酰胺单核苷酸对人体细胞有重要的生理功能,与人的免疫、代谢息息相关。研究表明,人们致力于开发高效的合成方法来实现大规模生产β-烟酰胺单核苷酸。目前β-烟酰胺单核苷酸的合成主要有两种途径,包括生物合成和化学合成。生物合成法,通常以烟酰胺和5’-磷酸核糖基-1’-焦磷酸作为底物,在烟酰胺磷酸核糖转移酶的作用下催化制备β-烟酰胺单核苷酸。这种方法酶的价格较高,而且来源有限,一般具有产能较低,生产成本较高的缺点,近年来,通过研发改进,生物合成法制备β-烟酰胺单核苷酸的产率得到提高,成本也逐渐降低。

关于食用烟酰胺单核苷酸调控,日服剂量这个问题,科学的一个表述是,8毫克的烟酰胺单核苷酸剂量适用于成人每天每千克标准,经此换算方法,每日560毫克的烟酰胺单核苷酸服用量才能满足一名体重70千克的成人用量,通过食物来补充同等量的烟酰胺单核苷酸,即需要食用毛豆32-128千克。通过食物补充烟酰胺单核苷酸的低效显而易见,而烟酰胺单核苷酸/NR补充途径,可以实现补充人体Nad+基因修复总量的85%的高数值。实验证实,人体转化NR与烟酰胺单核苷酸为Nad+的过程中,前者大部分被消化成NAM/β-烟酰胺单核苷酸,而烟酰胺单核苷酸可实现稳定不变。生产β-烟酰胺单核苷酸场所使用防爆型的通风系统和设备。

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β-烟酰胺单核苷酸能激发随着老化而逐渐衰弱的线粒体产生能量。太原β-烟酰胺单核苷酸生产企业

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